Definisi: Satu unit absorbansi didefinisikan sebagai jumlah asam nukleat yang akan menghasilkan pembacaan satu, ketika mengukur volume satu ml dalam kuvet kuarsa satu cm pada panjang gelombang 260nmm; sebenarnya ini diturunkan dari persamaan Beer-Lambda.
A = ebc
*
A adalah absorbansi (tidak ada satuan, karena A = log10 P0 / P)
*
e adalah absorptivitas molar dengan satuan L mol-1 cm-1
*
b adalah panjang jalur sampel - yaitu, panjang jalur kuvet di mana sampel terkandung. Kami akan mengungkapkan pengukuran ini dalam sentimeter.
Biowave II
Koefisien kepunahan individu untuk masing-masing empat basis DNA adalah:
*
A = Penyerapan maksimum pada 259nm, koefisien kepunahan = 15,4x103 M-1 x cm-1 (pH 7,0).
*
C = Penyerapan maksimum pada 271nm, koefisien kepunahan = 9,0x103 M-1 x cm-1 (pH 7,0).
*
G = Penyerapan maksimum pada 253nm, koefisien kepunahan = 13,7x103 M-1 x cm-1 (pH 7,0).
*
T = Penyerapan maksimum pada 267nm, koefisien kepunahan = 9,6x103 M-1 x cm-1 (pH 7,0).
Dari nilai-nilai ini kita dapat mengamati di mana kita memperoleh nilai 10, yang merupakan koefisien kepunahan rata-rata dari 4 nukleotida.
Formula praktis: Formula yang sangat sederhana dan berguna untuk mendapatkan molaritas adalah sebagai berikut:
# dari nanmol oligo = 1 / Ix10
Dimana
I = panjang oligo
10 = koefisien kepunahan rata-rata dari semua 4 nukleotida
Contoh: Berapa banyak mikromol yang ada dalam 1 OD dari oligo 20mer?
# of? mols = 1 / 20x10 = 0.005 = 5nanomoles
Perkiraan data DNA yang berguna:
* 1 A260 SSDNA panjang = 37? Gs
* 1 A260 dari oligo ss DNA = 33? Gs
* 1 A260 dari oligo ssRNA = 33';gs
* 1 A260 dari dsDNA = 50? Gs
* 1 A260 dari dsRNA = 40? Gs
Catatan: efek pendinginan pada pembentukan dupleks, absorbansi bukan penambahan yang tepat dari untaian individu, melainkan sekitar 1,5 kali (tidak dua kali seperti yang diharapkan).
Bio-Sintesis.Inc,telah memproduksi oligonukleotida sintetis selama lebih dari 25 tahun; tidak hanya DNA, tetapi RNA, oligonukleotida termodifikasi lainnya, dan menyediakan ikatan silang berbagai jenis biomolekul menggunakan strategi biokonjugasi kami yang dioptimalkan, yang memiliki sejumlah aplikasi pada penghambatan ekspresi gen dan studi anti-indera terkait. Juga peptida sintetik dan antibodi peptida untuk sejumlah aplikasi yang relevan secara biologis, di bidang proteomik, epigenetik, regulasi imun, modifikasi pasca translasi, antisense, kontrol ekspresi gen, gangguan RNA, dan banyak lagi. Untuk informasi produk lebih lanjut, kunjungi: http://www.biosyn.com.